Логотип журнала 9 месяцев
Войти через:

Получайте самое интересное: конкурсы, акции, новости
Конкурсы
Конкурсы
Форум
Форум


Сохранить стволовые клетки из пуповинной крови - все равно что застраховать жизнь ребенка
4

Роды от А до Я

Сохранить стволовые клетки из пуповинной крови - все равно что застраховать жизнь ребенка

Интервью с президентом Российского Общества акушеров-гинекологов Владимиром Кулаковым

Сегодня во всем мире активно развиваются клеточные технологии — уже не только как теоретическое, но и как практическое направление. Особые надежды медики возлагают на криоконсервацию особых, так называемых стволовых клеток — выделение и хранение их в условиях ультранизких температур, чтобы при необходимости использовать эти клетки потом для восстановления основных жизненных функций организма, утраченных вследствие болезни. Сегодня в мире насчитывается уже около ста банков стволовых клеток пуповинной крови — в США, Великобритании, Германии, Франции и других странах мира. Эти банки объединены в компьютерную сеть — мировой регистр банков пуповинной крови. Недавно такой банк открылся и в России — на базе Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН. О его функционировании и перспективах развития рассказывает главный акушер-гинеколог Минздрава РФ, президент Российского Общества акушеров-гинекологов, вице-президент РАМН, директор НЦ АГиП РАМН академик Владимир КУЛАКОВ.


Владимир Кулаков:

«Использование стволовых клеток можно считать естесственной формой «биологического» медицинского страхования жизни»

Владимир Иванович, давайте сразу начнем с центрально­го вопроса: что такое стволовые клетки, чем они отличаются от других клеток организма?

—  Это уникальная группа клеток организма, способных размно­жаться и давать начало основным клеточным компонентам крови, кост­ного мозга и иммунной системы. Они способны к самовоспроизводству и выполнению необходимых функций, т.е. они могут формировать клетки практически всех известных тканей человека.

  Что является источником стволовых клеток для воз­можной трансплантации?

—  Во-первых, костный мозг (донорский или аутологичный2), во-вторых, кровь пациента после проведения процедуры стимуляции кост­ного мозга, в-третьих, кровь, получаемая во время родов из пуповины и плаценты.

Почему наиболее перспективным, по сравнению с другими источниками, считается использование клеток пуповинной крови?

—  Получение стволовых клеток из костного мозга и периферичес­кой крови связано с применением инвазивных (хирургических) методов или введением высокоактивных фармакологических препаратов и может проводиться только в условиях специализированных стационаров. Это направление сегодня также развивается.

В чем же преимущество клеток пуповинной крови?

—  Это клетки уже сформированного организма — ребенка, кото­рый родился. В мире уже накоплен огромный опыт по их транспланта­ции: имеется более 3 тысяч случаев, из них примерно 90% удачных, в том числе удалось вылечить пациентов со злокачественными заболева­ниями. Стволовые клетки пуповинной крови обладают целым рядом пре­имуществ по сравнению с клетками из других источников: во-первых, они «молоды», т.е. обладают наибольшим потенциалом к делению и дифференцировке. Во-вторых, вероятность инфицирования пуповинной крови в процессе внутриутробного развития ребенка минимальна. По статистике, вирусы герпеса или цитомегаловирус обнаруживаются в крови пуповины менее чем в 1 % случаев (в крови взрослых людей — бо­лее 25%). В-третьих, стволовые клетки пуповинной крови обладают меньшей иммуногенностью1 при аллогенных2 трансплантациях. Успеш­ная трансплантация клеток пуповинной крови может быть выполнена даже при частичной несовместимости донора и реципиента, что недостижимо в случае использования костного мозга. В-четвертых, если срав­нивать трансплантацию клеток костного мозга и клеток пуповинной кро­ви, используемая доза стволовых клеток «молодой» пуповинной крови в несколько раз ниже аналогичной по эффекту дозы клеток из костного мозга взрослого человека.

Главное достоинство этих клеток (при «именном» хранении) — абсо­лютная генетическая идентичность тканям ребенка, из пуповинной крови которого они были получены, и частичная — в отношении организма матери и близких родственников. В этом случае современные клеточные технологии и прежде всего — использование стволовых клеток пуповин­ной крови можно считать естественной формой «биологического» меди­цинского страхования жизни и здоровья человека и членов его семьи.

Кроме того, замороженные стволовые клетки могут оказаться неза­менимой основой для новейших, пока неизвестных способов лечения многих заболеваний. Однажды полученные клетки могут храниться деся­тилетиями, и в случае необходимости их останется только извлечь из криогенного хранилища и разморозить, без потери времени на поиск (не всегда успешный) совместимого донора. Так что временной фактор здесь является еще одним преимуществом.

Владимир Иванович, во всем мире клеточные технологии уже достаточно давно являются сферой научных и практичес­ких интересов. А какова степень исследованности проблемы стволовых клеток в российской науке?Какие научные центры занимаются этой проблемой ?

—  В нашей стране изучением стволовых клеток занимаются многие НИИ, в том числе в Гематологическом научном центре академика А.И.Воробьева. Там очень сильная команда в отделении трансплантации костного мозга, которая занимается и прикладным аспектом стволовых клеток, фактически спасая людей.

Наш Центр акушерства, гинекологии и перинатологии является ро­доначальником клеточной терапии в российской медицине: еще в 80-90-е годы XXвека по заданию Минздрава мы разрабатывали эту проблему и получили хороший эффект, исследуя эмбриональные клетки, то есть клетки, забираемые у эмбриона после аборта. Сейчас идут активные ре­зультативные исследования стволовых клеток пуповинной крови.

В вашем Центре создан один из первых российских банков стволовых клеток пуповинной крови. Что способствовало его созданию?

— Дело в том, что этой деятельностью в мире занимаются уже более 15 лет. По данным зарубежных медиков, трансплантацию стволовых клеток пуповинной крови там используют достаточно широко для лече­ния около 100 заболеваний. У нас в России еще нет такого большого опыта, мы начинаем его создавать и накапливать. При создании нашего банка был учтен опыт аналогичных учреждений, существующих в США, Англии и Германии.

— Созданный  вами «КриоЦентр» это целиком коммер­ческая структура ?

— Да, сейчас на нашей базе создан первый в России коммерческий банк стволовых клеток, мы его организовали на средства спонсоров. В скором вре­мени планируется создание еще двух банков — в Москве и Петербурге. Но в дальнейшем мы предполагаем создание аналогичного государственного банка, как на  Западе,  где государство дает деньги на забор и хранение стволовых клеток, а если у кого-то возникла необходимость использовать их для лечения, в частности при злокачест­венных новообразованиях, то больница заказывает эту пуповинную кровь в банке: ее подбирают так же, как подбирают донорские сердце или печень. За это больница платит банку и получает нужный образец.

Чем регламентирована деятельность «КриоЦентра»?

—  Все процедуры и процессы по забору и хранению пуповинной крови регламентированы Минздравом, а также соответствуют международным стандартам таких организаций, как Международная Ассоциация стволовых клеток и Международная Ас­социация клеточной терапии. Это организации, ко­торые существуют уже порядка 10 лет и выдают практически все регламентирующие документы, ка­сающиеся работы со стволовыми клетками.

От каких болезней страхуют челове­ка и во многом его семью стволовые клетки?

—  Эти клетки могут быть использованы при лечении большого количества как наследствен­ных, так и приобретенных заболеваний. Напри­мер, при серьезных заболеваниях крови они необ­ходимы для замены кроветворной ткани пациента. Они могут быть применены для лечения острых и хронических заболеваний сердечно-сосудистой, эндокринной, центральной нервной системы (ин­фаркт миокарда, инсульт, сахарный диабет), при генетических нарушениях, злокачественных обра­зованиях, болезнях опорно-двигательного аппа­рата, при тяжелых травмах. Причем возможно, что в недалеком будущем, с развитием новых клеточных технологий, сфера применения стволовых клеток может очень расшириться.

А за этот срок работы со стволовыми клетками уже вы­явлены негативные тенденции при их использовании для лече­ния?

—  Пока мы не сталкивались с этим, видели только положительный результат, исследования продолжаются. Некоторые ученые говорят, что может пойти не та дифференциация трансплантируемой стволовой клет­ки в организме: стволовая клетка дифференцируется на 200 видов кле­ток, которые существуют в нашем организме. Это и костные, и сердеч­ные, и нервные, и мышечные, и все другие. Эта клетка настолько уни­кальна, что позволяет сформировать из себя все что угодно. Наша зада­ча — добиться того, чтобы давать этим стволовым клеткам определен­ный импульс, который бы позволял дифференцироваться в ту ткань, ко­торую мы хотим. Пока мы это не можем, пока мы их только вводим в ор­ганизм, и организм сам дает импульс для дифференциации. Если, напри­мер, случился инсульт, то мы вводим клетки в область мозга, где и прои­зошло кровоизлияние, и уже там эти клетки начинают преобразовывать­ся в нервные клетки. Если случился инфаркт, то мы вводим их или внут­ривенно, или непосредственно в сердце — они начинают формировать­ся и заменять кардиомиоциты3.

А что вы можете сказать об исследовании эмбриональ­ных клеток, которые тоже относят к стволовым?

—  Эмбриональные клетки — это благодатный объект для науки, их потенциал огромен. Но вопрос их применения сегодня даже не стоит. И дело здесь даже не столько в морально-этическом аспекте, связанном с использованием абортивного материала, о котором много говорят, особенно на Западе. Дело в том, что ме­ханизм их дифференциации еще четко не выявлен, по­этому сначала их надо хорошо изучить, а потом думать о применении: эмбриональными клетками занимаются очень серьезно, но использовать их можно будет, может быть, через 30—40 лет, когда научатся ими управлять, а эта проблема настолько же глобальна, как и пробле­ма роста раковых клеток. В принципе, механизмы функ­ционирования у них практически одинаковы.

Давайте вернемся к вопросу об использо­вании замороженных стволовых клеток други­ми членами семьи. Какова вероятность того, что хранящиеся в банке стволовые клетки мо­гут им пригодиться?

— Высокий шанс оказаться иммунологически совместимыми есть у кровных родственников, т.е. у матери, братьев, сестер ребенка, чьи клетки хранятся в банке стволовых клеток. Тогда ребенок выступает донором4, а иммунологически совместимые с ним родственни­ки — реципиентами5. Наибольшие шансы оказаться совместимыми имеют близнецы и дети одних многодетных родителей.

Эта вероятность имеет статистическое подтвержде­ние?

—  Статистически она относительно невысока: в случае злокачест­венных заболеваний — от 1 случая на 500 человек до 1 на 5000.

На чем основана совместимость клеток донора и реципи­ента? Что может произойти, если стволовые клетки не по­дойдут пациенту?

—  Успех трансплантации определяется точностью подбора совмес­тимой пары «донор-реципиент» по определенным антигенам (белкам) так называемого комплекса гистосовместимости, т.е. свойством органа, ткани или клеток донора не отторгаться организмом реципиента. Преж­де чем производить трансплантацию, нужно провести так называемое HLA-типирование — по нему определяется степень совместимости. В идеальном варианте — это 6 совпадений из 6 возможных (3 гена ребе­нок наследует от матери, 3 — от отца). Если несовпадений — больше трех, то трансплантация не будет успешной ни при каких условиях. Либо трансплантат будет отторгнут иммунной системой реципиента, либо, что еще хуже, разовьется болезнь «трансплантант против хозяина»6.

—  На Западе активно обсуждается возникшая в связи с развитием новых клеточных технологий проблема выращи­вание детей «по заказу», т.е. когда  в семье есть больной ребе­нок, родители рожают другого, чтобы использовать стволо­вые клетки для лечения больного. Как вы можете прокоммен­тировать эту проблему?

— Это пока единичные случаи. Но они оправданы. Потому что в пер­вый раз, когда мать рожала, не было возможности сохранить клетки, а теперь ее ребенку нужна помощь.

Итак, давайте теперь обратимся к насущному вопросу о том, когда и как именно происходит забор и хранение стволо­вых клеток из пуповины?

—  Процедура забора пуповинной крови занимает всего несколько минут и абсолютно безопасна как для матери, так и для ребенка. Она никак не влияет на течение родов и может проводиться как в ходе нормальных родов, так и при кесаревом сечении.

Происходит это так: рождается ребенок, пересекается пу­повина, и пуповинная кровь собирается специально обученным персоналом родового отделения в стерильный контейнер, со­держащий раствор антикоагулянта3. Далее собранная пупо­винная кровь незамедлительно доставляется в специализиро­ванную лабораторию, где из нее выделяются стволовые клет­ки. С момента получения пуповинной крови до начала выделе­ния стволовых клеток может пройти не более 12—24 часов (при условии правильного хранения). В последующие 24 часа количество жизнеспособных стволовых клеток значительно уменьшается.

Какая доза крови берется?

—  Все, что удается собрать при родах, — это от 40 до 150 мл. Средний объем пуповинной крови, который удается собрать, — примерно 80—85 мл. Бывает и больше: 120, 130, 140 мл. Это уже за­висит от особенностей мамы, от срока беременности, от веса ребенка — такие чисто биологические параметры. Чем больше крови, тем больше клеток будет выделено, соответственно, трансплантация может быть вы­полнена более результативно. Дело в том, что трансплантация проводит­ся из расчета числа клеток к весу пациента. Соответственно, чем боль­ше клеток мы сохраним, тем старше будет возраст и больше вес паци­ента, которому они могут быть успешно трансплантированы. Если мы собрали 100—120 мл, то этих клеток заведомо достаточно для тран­сплантации взрослому.

  Можно ли оговорить с роженицей, что представитель «КриоЦентра» выедет с контейнером в выбранный ею роддом?

—  Заготовка пуповинной крови происходит пока только в родовом отделении Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, но в ближайшее время с нашим банком будет сотрудничать еще несколько родильных домов. На первых порах мы готовы направлять для забора крови наших обученных сотрудников, но лучше, если это будут уметь делать акушеры и медсестры на местах.

  Где и как происходит выделение из пуповинной крови стволовых клеток? Зачем их выделять и почему просто нельзя хранить собранную кровь?

—  Дело в том, что содержание стволовых клеток в пуповинной крови относительно невелико — менее 1% от всех лейкоцитов. Эрит­роциты и прочие элементы крови являются ненужным балластом. В процессе выделения стволовых клеток кровь подвергается поэтапной обработке, в результате чего происходит освобождение от избытка плазмы, практически всех эритроцитов и большинства зрелых лейко­цитов. Выделенные стволовые клетки находятся в аутологичной8 плазме, так что нет никаких чужеродных для человеческого организма компонентов. Данный способ является дорогим, но наиболее эффек­тивным.

Выделение стволовых клеток и их анализ проводятся с применени­ем только одноразовых расходных материалов, в специальном «чис­том» помещении, оснащенном подачей стерильного воздуха. Это единственное место, где образец крови контактирует с внешней сре­дой. Во всех остальных случаях он находится в герметично закрытой посуде. В лабораториях соблюдены все так называемые технические условия международного стандарта GMP.

Какие делаются анализы?

—  Во-первых, определяется количество клеток (мы их считаем буквально поштучно); во-вторых, — группа крови, резус-фактор новорожденного, даже если это было сделано в родблоке — мы повто­ряем, чтобы не было ошибок. Здесь же происходит определение жиз­неспособности клеток перед замораживанием (мы должны убедиться, что после выделения они все живые), а также проверка на стериль­ность в плане бактериальной и грибковой инфекции. Ни один образец стволовых клеток не будет направлен на хранение вместе с остальны­ми, не будучи признанным «чистым» в отношении опасных инфекций. Время, необходимое для получения результатов тестирования, образ­цы стволовых клеток проводят на «карантинном» хранении, исклю­чающем контакт с другими пробами.

Какова технология хранения выделенных клеток?

— Стволовые клетки расфасованы в несколько ампул — в случае необходимости это позволит использовать нужное на данный момент количество клеток, а оставшиеся сохранить для будущих нужд, учи­тывая быстрое развитие новых клеточных технологий. Каждая ампу­ла с клетками помещается в герметично запаянный пластиковый пе­нал, обеспечивающий дополнительную защиту содержимого и марки­ровки. Вместе с основными хранятся маленькие ампулы-спутники, которые в случае необходимости извлекаются перед началом тран­сплантации; и по ним проверяются все нужные параметры. Клетки замораживаются в специальных установках — программных замораживателях, куда порционно подается жидкий азот и где температура плавно понижается с комнатной до -90 °С, по специальной програм­ме без колебания температуры. После этого их уже можно перекла­дывать в жидкий азот. Замораживатель параллельно рисует график снижения температуры, что является еще одним подтверждением правильности этой процедуры. Этот график впоследствии хранится в папке со всеми данными, характеризующими образец клеток. И потом клетки хранятся в сейфе-хранилище в жидком азоте при темпе­ратуре -196 °С — именно при такой температуре они сохраняют жиз­неспособность и биологическую активность на протяжении неограни­ченного времени.

 Сколько лет хранятся клетки?

—  Практически неограниченное время. Наш договор рассчитан на 15 лет — это срок, определенный большинством существующих в мире банков стволовых клеток, но при желании его можно продле­вать.

Как отреагирует хранилище клеток на внезапное отк­лючение электроэнергии, разного рода аварии и техногенные катастрофы?

—  Чтобы построить такое помещение в нашем Центре, было затрачено очень много средств. Это сейф из металла, и если везде будет бушевать пожар, по техническим требованиям сейф и распо­ложенное в нем современное оборудование выдержат его в течение нескольких часов, образцам ничего не угрожает. При отключении электричества он автономно будет хранить образцы крови, так как здесь стоит электрогенератор.

  Проходит ли беременная женщина, решившая сохра­нить пуповинную кровь своего ребенка, какие-то обследования и зачем?

— Если кровь ма­тери инфицирована, то она может инфициро­вать пуповинную кровь, поэтому при­мерно за 30 дней до предполагаемого вре­мени родов или непос­редственно перед ро­дами кровь матери должна быть дополнительно обследована на наличие возбудителей вирусных и бактериаль­ных инфекций, опасных для здоровья: ВИЧ, гепатитов, цитомегаловируса, токсоплазмоза, сифилиса, вируса Т-клеточного лейкоза челове­ка. Если анализы отрицательные, считается, что за месяц до родов мать уже практически не может инфицироваться СПИДом, гепати­том, но полученную во время родов пуповинную кровь мы проверяем, анализы повторяем, и, пока мы не убедимся в их чистоте, клетки у нас стоят на карантине.

В каких случаях пуповинная кровь не может быть ис­пользована для трансплантации?

—  Есть абсолютные и относительные противопоказания. Абсо­лютными противопоказаниями являются: положительные результаты тестирования в отношении хотя бы одного из перечисленных заболе­ваний у матери; бактериальное или грибковое инфицирование пуповинной крови или выделенных стволовых клеток.

Относительные: низкое содержание стволовых клеток ввиду малого объема полученной пуповинной крови или её индивидуальных осо­бенностей.

  Во сколько обойдется процедура забора крови и ее хранение, а также предварительные анализы матери и тестирование полученного клеточного материала ?

—  В формировании цены есть несколько составляющих:   административные   расходы (пакет документов, индивидуальный набор для забора пуповинной крови, получение пуповин­ной крови и т.п.), лабораторные анализы крови матери и пуповинной крови, выделение и хра­нение стволовых клеток, включая тесты и за­мораживание, всего получается 2350 евро. Хранение клеток в течение каждого последую­щего года — еще 100 евро. Если пуповинная кровь оказывается инфицированной и непри­годной для дальнейшего использования, удер­живается стоимость медицинских препаратов, и оговоренная сумма возвращается пациенту. Но все равно стоимость затрат на выделение и хранение аутологичных стволовых клеток из пуповинной крови в десятки раз меньше, чем поиск и приобретение аналогичных, но донорс­ких (аллогенных) — стоимость одного образца пуповинной крови, предоставляемого между­народными   банками-регистрами  для  тран­сплантации, — от 18 000 до 25 000 долларов.

С Владимиром Кулаковым беседовала Ольга Молдавская.


1Иммуногенность - способность вызывать некоторые осложнения, в т. ч. болезнь «трансплантат против хозяина»,
2Алогенные — органы, ткани или клетки, происходящие из организма, отличного от организма пациента.
3Кардиомиоциты - клетки сердечной мышцы, за счет которых сердце сокраща­ется.
4Донор - пациент, предоставляющий свои органы, ткани или клетки для тран­сплантации.
5Реципиент — пациент, которому производится трансплантация.
6Болезнь «трансплантат против хозяина» — это тяжелое, иногда несовместимое с жизнью заболевание, являющееся осложнением трансплантации. Связано с имму­нологической несовместимостью тканей донора и реципиента. Клетки иммунной системы, образовавшиеся из трансплантированных стволовых клеток донора, восп­ринимают ослабленный организм реципиента в качестве «чужака» и начинают с ним бороться.
7Антикоагулянт — фармакологический препарат, препятствующий свертыванию крови.
8Аутологичные — органы, ткани или клетки самого пациента.

p

Источник фото: Shutterstock


Рассказать друзьям

Нравится

Оцените статью:

4 комментариев


Загрузка...

Подписаться на отзывы RSS

Комментарии к статье

1—4 из 4

Давно слышала о полезности этих клеток, задумывалась о такой процедуре , но узнав цену))) бред полный !!! Столь полезная вещь и столь не доступная для многих людей .. Этими клетками можно было б помочь многим людям .. Но как всегда здоровье стоит море денег ..жаль оч жаль ..

17 ноября 2015 22:28

отрезая пуповина сразу при рождении ребенка, вы лишаете своего ребенка очень важных веществ!Все верите этим достижениям науки..

27 января 2012

Идея использования стволовых клеток - это что-то невероятное. Я скоро стану мамой и уже на 90% уверена, что воспользуюсь услугой забора пуповинной крови: сердце обливается кровью, когда читаешь в газетах или видишь в телепередачах несчастных родителей, которые пытаются найти деньги на дорогостоящие операции для своих детей. А тут такая возможность! Хотя некоторые опасения по поводу есть, например, можно ли быть уверенной, что тот же Гемабанк, к примеру, никуда не денется через пять, десять лет?

16 февраля 2010

статья интересная. но я думаю, что в нашей стране велика возможность исчезновения конкретного образца для состоятельных людей, нуждающихся в нем за определенное вознаграждение персоналу криоцентра

15 января 2010

Ваш комментарий:

* - обязательные поля.

Пожалуйста, введите буквы, изображенные на картинке.
Буквы чувствительны к регистру.

Конкурсы

Кастинг "Хочу на обложку"
Александра Николаева
Николаева срок 16 неделек)
Николаева срок 16 неделек)
АнастасиЯ
Счастье
Счастье
Екатерина
В ожидании чуда
В ожидании чуда
Александра
31 неделя (29.04.16)
31 неделя (29.04.16)
Olga
Мой маленький секрет
Мой маленький секрет
Ольга
Моя радость
Моя радость
Полина
Ждем первенца 8 месяцев
Ждем первенца 8 месяцев
Алиса
Алиса в ожидании своего зайчика
Алиса в ожидании своего зайчика
Виктория
В ожидании чуда
В ожидании чуда
Валерия Зарубина
Воистину счастлива та женщина, которая носит под сердцем ребёнка зачатого от любимого мужчины !
Воистину счастлива та женщина, которая носит под сердцем ребёнка зачатого от любимого мужчины !
лейсан нуруллина
Хочу на обложку
Хочу на обложку
Виктория
Хочу на обложку
Хочу на обложку
yanagolubeva
мои 23 недели
мои 23 недели
daryaanfiniti
Новогодняя беременность
Новогодняя беременность
Светлана Балий
С любимой малышкой
С любимой малышкой
Anastasia
самый долгожданный на свете ребенок
самый долгожданный на свете ребенок
Виктория
Нам уже добрых, вымученных и прекрасных 8 месяцев
Нам уже добрых, вымученных и прекрасных 8 месяцев
Альбина
В ожидании чуда
В ожидании чуда
Татьяна
Фото для кастинга Хочу на обложку
Фото для кастинга Хочу на обложку
Алсу
Ожидаю
Ожидаю
Anna
1 фото
1 фото
Юлия
Юлия
Юлия
Юлия
Как же долго я тебя ждала!
Как же долго я тебя ждала!
Юлия
сказочное ожидание
сказочное ожидание
Varvara_mi
В ожидании чуда...
В ожидании чуда...
violetta22
В ожидании нашей малышки Миланы
В ожидании нашей малышки Миланы
Анастасия
В ожидание чуда
В ожидание чуда
Татьяна
хочу на обложку !!! на 7 месяцев
хочу на обложку !!! на 7 месяцев
Все конкурсы

Сейчас читают

Интересное в сети

Загрузка...






Партнеры
www.konliga.biz www.2mm.ru mamaexpert.ru niani.com mamaexpert.ru samaya.ru
Contact our mail department if you are desperate to get blacklisted. www@9months.ru
1 пиксель белый